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人UroplakinII與小鼠UroplakinII啟動(dòng)子活性和組織特異性對(duì)比
畢業(yè)論文
| 全部作者： | 朱宏建 曾祥福 魏守順 郭應(yīng)祿 |
| 第1作者單位： | 武警總醫(yī)院泌尿外科 |
| 論文摘要： | 膀胱癌是泌尿外科最常見的惡性腫瘤，基因治療已成為治療惡性腫瘤的重要方法之1。本研究旨在探討人UroplakinII (UPII) 啟動(dòng)子與小鼠UPII啟動(dòng)子在人細(xì)胞株中的啟動(dòng)活性和組織特異性強(qiáng)弱。方法: 構(gòu)建以人或小鼠UPII啟動(dòng)子為調(diào)控基因，以綠色熒光蛋白（GFP）和熒光素激酶（Luc）為報(bào)告基因的重組質(zhì)粒，應(yīng)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)，將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞（BIU-87）和腎癌細(xì)胞（GRC-1）、臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞（EC）、肺癌細(xì)胞（A549）、皮膚成纖維細(xì)胞（Hs27），利用共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀和微板檢測(cè)儀觀察細(xì)胞表達(dá)GFP和Luc的情況。結(jié)果: 含人UPII啟動(dòng)子重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后，BIU-87表達(dá)GFP較多，10-15/HP，亮度較強(qiáng)，流式細(xì)胞儀測(cè)定表達(dá)量為10.1%。而GRC-1、EC細(xì)胞表達(dá)極少，0-5/HP，亮度暗，流式細(xì)胞儀測(cè)定表達(dá)量為0和1.8％。Luc在BIU-87中的表達(dá)量是其它組織細(xì)胞的2.2倍以上。含小鼠UPII啟動(dòng)子重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后，BIU-87表達(dá)GFP較多，5~10/HP，亮度較強(qiáng)，流式細(xì)胞儀測(cè)定表達(dá)量為4.34%。而EC細(xì)胞表達(dá)極少，0~2/HP，亮度暗，流式細(xì)胞儀測(cè)定表達(dá)量分別為0%。Luc在BIU-87中的表達(dá)量是其他組織細(xì)胞的1.8~8.2倍，人UPII啟動(dòng)子與小鼠UPII啟動(dòng)子相比，無論是GFP還是Luc差異有顯著性（P<0.01）。結(jié)論: 人UPII 啟動(dòng)子比小鼠UPII啟動(dòng)子在人細(xì)胞株中具有更高的啟動(dòng)活性和更低的組織特異性。為靶向性基因治療膀胱癌提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 |
| 關(guān)鍵詞： | UroplakinII；啟動(dòng)子；膀胱癌 遠(yuǎn)程下載 論文(免費(fèi)PDF論文全文) |
| 發(fā)表日期： | 2006年11月30日 |
| 同行評(píng)議： | （暫時(shí)沒有） |
| 綜合評(píng)價(jià)： | （暫時(shí)沒有） |
| 修改稿： |
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