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針刺對抑郁癥模型大鼠海馬區(qū)單胺類神經遞質的影響
【關鍵詞】針刺治療；抑郁癥；疾病模型；大鼠；行為學；5-HT；NE
Effects of acupuncture on serotonin and norepinephrine in hippocampus of depressed model rats
【Abstract】Objective To observe how acupuncture affects the mechanism of depression model rats.Methods Using Open-Field method to randomly select 40 adult SD male rats into normal control, model group, drug treatment and acupuncture treatment group, 10 rats per group. Separation, long term unpredictability, medium stimulation techniques were applied to modify rats? behavior. Then using Open-Field method to reflect changes in depressed model rats? behavior between groups treated with acupuncture and control. And the concentration of monoamine neurotransmitters and their metabolites in hippocampus of rat brain were determined by HPLC-ECD. Results Compared with normal control, acupuncture treatment group’s behavior was not different （P＞0.05）on the 7th day after treatment. On the 21th day after treatment, acupuncture treatment group’s behavior was not different （P＞0.05）with drug treatment group, and was more different with model group（P＜0.01）. Compared with normal group on the 21th day of treatment, the concentration of serotonin and norepinephrine in hippocampus of acupuncture treatment group was not different （P＞0.05）, whereas was more different with model group （P＜0.05，P＜0.01）.Conclusion This experiment proved that acupuncture treatment could change the behavior abnormality of depressive model rats. The curative effects is comparable to flouxetine. The changes of the concentration of serotonin and norepinephrine in hippocampus are one of the mechanism.
【Key words】acupuncture treatment；depression；disease model；rat；behavior；5 hydroxytryptamine (5-HT);NE
自1984年，針灸開始介入抑郁癥的治療以來，取得了確切的臨床療效，但是對于針刺作用的過程和機制研究尚不深入。為了探討針刺在抑郁癥治療中的應用規(guī)律，我們觀察了針刺對抑郁癥模型大鼠海馬區(qū)內單胺類神經遞質的影響，并與氟西汀（選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑）作對照。現將研究結果報告如下。
1 材料與方法
1.1 動物與分組
成年SD大鼠，體重180～220g，雄性，南京中醫(yī)藥大學動物中心提供。首先用Open-Field法作行為學評分，選擇得分相近的40只大鼠進行實驗分組。將大鼠隨機分為正常組、模型組、藥物組、針刺組，共4組，每組10只；正常組每籠飼養(yǎng)5只，模型組及針刺組每籠飼養(yǎng)1只（分養(yǎng)）。
1.2 實驗方法
1.2.1 復制模型
參考文獻［1］復制抑郁癥模型：模型組、藥物組、針刺組大鼠，共接受21天各種不同的應激，包括冰水游泳（4℃，5min）、熱應激（45℃，5min）、禁水（24h）、夾尾（1min）、電擊足底（電壓50mV，每隔15s刺激1次，每次持續(xù)10s，共15次）、搖晃（1次/s，5min）、禁食（24h）和晝夜顛倒等刺激，平均每種刺激各4次。正常組，常規(guī)飼養(yǎng)，不接受任何應激性刺激。
于實驗第1、21天測定各大鼠行為學（水平運動和垂直運動）。
1.2.2 治療方法（實驗第21天，進入治療階段）
正常組，繼續(xù)常規(guī)飼養(yǎng)，每籠飼養(yǎng)5只。模型組，繼續(xù)分養(yǎng)，每籠飼養(yǎng)1只；常規(guī)飼料喂養(yǎng)，不予應激性刺激，也不予任何治療措施。藥物組，繼續(xù)分養(yǎng)，每籠飼養(yǎng)1只；常規(guī)飼料喂養(yǎng)，不與應激性刺激，按照1.8mg/kg給予氟西汀，將藥物溶解于生理鹽水中灌胃。1日1次治療，連續(xù)21天。針刺組，根據《實驗針灸學》［2］大鼠穴位定位方法，選擇百會、內關、三陰交，并參照人和動物的穴位解剖結構特點，在華興邦研制的大鼠針灸穴位圖譜基礎上，在大鼠前正中線上，額頂骨縫交界線前方處定位神庭穴。針刺方法：常規(guī)穴位消毒，選用蘇州醫(yī)療用品廠生產的“華佗”牌32號1.0寸針灸針進行治療。百會穴向前斜刺，神庭穴向上斜刺，進針深度約為2mm，內關直刺1mm，三陰交直刺5mm，每穴行均勻捻轉刺激30s，留針10min。1日1次治療，連續(xù)21天。
分別于實驗第28、35、42天測定各鼠行為學的變化。
1.3 行為學測定
Open-Field法［3］測定大鼠行為學。本實驗所用敞箱為正方形，長、寬各80cm，高40cm，底面由面積相等，邊長16cm的正方形25塊組成，白色內面，以動物穿越底面的塊數為水平活動（crossing）得分，以直立次數為垂直活動（rearing）得分，每次3min。
1.4 高效液相-電化學（HPLC-EC）技術與單胺類神經遞質的檢測
1.4.1 試劑
去甲腎上腺素酒石酸鹽（NE）、5-羥色胺鹽酸鹽（5-HT）、3-甲氧基-4-羥基苯乙二醇（MHPG）、5-羥吲哚乙酸（5-HIAA）（以上為SIGMA公司產品），乙二胺－四乙酸二鈉（EDTA）（分析純，汕頭金砂化工廠，批號：010304）、辛烷基磺酸鈉（東京化成工業(yè)株式會社，批號：A87509A）、無水乙酸鈉（分析純，南京化學試劑廠，批號：971142）、檸檬酸（分析純，上海榮潤化工有限公司，批號：20010630）、二正丁胺（化學純，中國常州市光明生物化學研究所，批號：960308）、高氯酸（分析純，上海桃浦化工廠，批號：0710）、甲醇（一級品，高效液相色譜專用，江蘇淮陰塑料制品廠精細化工研究所，批號：980512），實驗用水為重蒸餾水。
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